瑞晶生物可以帮助客户解决各种克隆和蛋白表达的瓶颈问题。蛋白表达纯化服务包括密码子优化、基因合成、表达载体的构建、小规模的蛋白表达与纯化和大规模的蛋白表达与纯化等。已建立多种蛋白质表达系统,包括原核表达系统、酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统,并掌握了多种蛋白纯化技术,完全可以满足客户不同的需求。
服务特色:
★ 多样的表达系统:具有多种蛋白质表达系统,包括原核、酵母、杆状病毒-昆虫细胞和哺乳动物细胞表达系统方便顾客根据情况选择最合适的表达系统。
★ 大规模蛋白表达:瑞晶在小规模和大规模蛋白表达方面具有很强的实力。我们的大规模蛋白生产设施包括发酵罐,转瓶和国际上先进的wave mixers反应器,能够生产毫克至千克级的蛋白质,能够满足绝大多数工业用户 的需要。
★ 多样的纯化方法:通常瑞晶生物提交给客户的蛋白都是经过亲和层析纯化的。此外,还提供许多其他纯化方法包括凝胶过滤、离子交换、疏水层析等。
服务范围:
◆ 表达构建: a.密码子优化和基因合成服务 b.各种表达载体构建服务
◆ 发酵: 细菌和酵母的大规模培养
◆ 小规模表达和纯化: a.表达条件优化 b.小规模蛋白的纯化 c.瞬时转染表达与纯化
◆ 稳定细胞系的建立: a.重组酵母筛选服务 b.稳定表达的哺乳动物细胞系建立
◆ 重组杆状病毒: a.重组杆状病毒的扩增与纯化 b. 昆虫细胞表达与蛋白纯化
◆ 大规模生产和提纯: 用发酵罐、生物反应器和wave mixers大规模表达蛋白
◆ 纯化方案: a.亲和层析 b.凝胶过滤 c.疏水层析 d.离子交换
此外,瑞晶还为客户提供相关的配套服务:
◎密码子优化:密码子优化技术能够将原始的序列修改后,更利于基因在相应的表达宿主进行表达,调整GC含量并 消除其它潜在问题,如不合适的二级结构。大量的客户反映经过密码子优化后蛋白表达得到了显著提高。
◎灵活的标签选择:瑞晶生物提交给客户的蛋白不含有标签,客户可根据需要选择His、GST等纯化或检测标签。
项目 |
主要步骤 |
交付内容 |
时间 |
原核表达 |
1.亚克隆 |
载体构建报告 |
2周 |
|
2.表达优化及确认 |
实验报告 |
2周 |
|
3.表达及纯化 |
至少1mg已纯化的可溶性标记蛋白及实验报告 |
1周 |
酵母表达 |
1.亚克隆 |
载体构建报告 |
2周 |
|
2.表达优化及确认 |
实验报告 |
3-5周 |
|
3.表达及纯化 |
至少1mg已纯化的可溶性标记蛋白及实验报告 |
2周 |
杆状病毒-细胞表达 |
1.亚克隆 |
载体构建报告 |
2周 |
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2.病毒扩大化培养 |
5ml,>107pfu/ml病毒 |
3-4周 |
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3.表达优化及少量蛋白制备测试 |
表达报告 |
2周 |
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4.蛋白表达及纯化 |
至少1mg已纯化的可溶性标记蛋白及实验报告 |
1周 |
哺乳动物细胞表达 |
1.重组载体构建及扩大化培养 |
载体构建报告 |
2周 |
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2.瞬时蛋白表达 |
实验报告,瞬时或稳定蛋白表达细胞系,条件培养液 |
3-5周 |
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3.小规模蛋白表达 |
胞浆及实验报告 |
1-2周 |
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4.大规模蛋白制备 |
胞浆及实验报告 |
2-3周 |
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5.蛋白纯化及鉴定 |
已纯化的蛋白,实验报告及实验方案 |
1周 |